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做实时定量pcr需要哪些试剂?
我想先从人血液中提取mRNA,然后逆转录成CDNA,最后做实时定量pcr,这个过程需要哪些试剂盒或者试剂,请稍微讲详细一点,新人做实验,谢谢!!!
网友 3

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回答者:网友
说一下自己做实验时候用到的东西,血液提取mRNA还是采用试剂盒来提取,手工法极不推荐,但是试剂盒还是蛮贵的,可以问一下天根公司,价格还算可意 ,效果也不错。逆转录过程可以用Fermentas一款逆转录试剂盒,实时定量我们都是用Invitrogen的实时定量试剂,我们学校做实时因为是收费的,所以 本人还用过一阵子Takara的实时荧光试剂盒,循环时间比较短,效果也不错,就是比较贵。以上都是本人做实验时用到的,性价比应该还是蛮高的,希望能给你些帮助

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1.提取mRNA所需试剂: (1)Trizol,很多公司都有卖的,可以看你们实验室经常购买的公司是哪种,问公司技术员; (2)异丙醇、无水乙醇、氯仿; (3)RNase-free水,或DEPC处理水; 2.逆转录所需试剂: 一般使用现成的逆转录试剂盒,要实时定量PCR专用的。TAKARA公司的DRR036和DRR037就不错。 3.实时定量PCR所需试剂: 使用现成的实时定量PCR试剂盒。TAKARA公司和TOYOBO公司都有很多种,具体的要看你的实验要求,可以咨询对应公司技术员。
回答者:网友

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血液里面提RNA好像是要用试剂盒 反转录的话要反转录酶,OligoT,buffer,RNA酶抑制剂,DEPC水, real time的话要mix和 sybergreen
回答者:网友

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