一、试验简介荧光定量PCR是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。
荧光定量PCR的应用范围:在分子生物学领域应用于核酸定量分析、基因表达差异分析、SNP检测、甲基化检测等;在医学领域应用于产前诊断、病原体检测、药物疗效考核、肿瘤基因检测等。
荧光定量PCR的主要优点:(1)能够对样品进行定性和定量的分析。(2)较普通PCR实验时间短,实验效率高。(3)PCR反应和检测都在反应管中进行,样品污染的几率大大降低。
二、实验流程:
三、服务要求: (1)提供新鲜或保存完好的细胞(至少5×106)、动植物组织(至少50mg)、血液(300μl)等样本材料;
(2)提供样品的基因组DNA;
(3)纯化好的总RNA或反转录好的cDNA(OD260/OD280在1.9-2.1之间);
(4)提供待测基因序列或登录号,样品来源等。
四、订购信息:服务名称 | 服务内容 | 周期 | 报价 |
基因组DNA提取 | 新鲜组织、血液、细胞、细菌、真菌 | 1-2周 | 100元/样品 |
总RNA提取 | 新鲜组织、血液、细胞 | 1周 | 120元/样品 |
反转录 | 提交cDNA第一条链 | 1周 | 80元/样品 |
相对定量SYBR法 | 上机检测,3次实验重复,数据分析 | 2-3周 2-3周 3-4周 | 250元/样品(10-20个样品) 230元/样品(20-40个样品) 180元/样品(>40个样品) |
绝对定量SYBR法 | 不包含标准品的制备 | 2-3周 2-3周 3-4周 | 250元/样品(10-20个样品) 230元/样品(20-40个样品) 180元/样品(>40个样品) |
标准品的制备 | PCR扩增,载体构建和浓度测定 | 2周 | 1000元/样品 |
五、报告内容:实验方法,步骤,所用试剂,仪器,RNA/DNA浓度,电泳图片,扩增曲线,熔解曲线,
Ct值以及数据统计分析(可选),保留剩余引物和模板。
六、部分实验结果: